종자시험

  종자시험은 종자의 활력과 품질을 조사하기 위한 과정으로, 발아율, 종자의 순도, 잡초의 유무, 수분함량, 종자 무게 등을 평가하고, 발아능력과 종자의 활력을 검사한다. 특히 발아율과 발아능력은 균일한 발아를 결정하는 요인이 되기 때문에 중요하다.

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1. 발아시험

  발아시험은 종자의 발아능력을 직접 평가하기 위한 절차이다. 발아능력은 적절한 환경에서 종자가 발아하여 식물로 성장할 수 있는 능력을 의미하며, 환경조건에 따라 크게 다를 수 있기 때문에 엄격한 조건에 서 시험을 실시해야 한다. 국제종자시험연합회(International Seed Testing Association, ISTA)에서는 시험결과를 국제적으로 비교하고 정보를 공유하기 위한 표준발아시험 절차를 규정하고 있다. 이러한 방법은 최상의 조건에서 발아를 유도하여 최대 발아율을 얻기 위한 것이다.

  ISTA에서 권장하는 방법은 주간에 30℃에서 8시간, 야간에 20℃에서 16시간 동안 발아를 유도하는 방법이 포함되며, 전체 수목 종수의 70%가량에서 사용할 수 있다.

빛의 광도는 750~1,500lx 정도를 유지하고, 일반적으로 발아기간은 30일이다.30일이다. 그러나 이러한 조건은 종자에 따라 다를 수 있으며, 온도를 낮추거나 종자휴면이 상태에 따라 전처리를 수행하기도 한다. 종자 휴면의 정도를 정확히 알 수 없을 때 3℃에서 20~60일 동안의 저온 전처리를 병행한다.

 

2. 활력시험

  발아시험은 종자의 발아 능력을 확실하게 확인하는 방법이지만 시간이 많이 소요되는 단점이 있다.

대신 종자가 살아 있는지를 확인하는 여러 가지 종자활력시험이 존재하며, 국제적으로 인정받는 방법에는 테트라졸륨 시험과 배 추출 시험이다. 그러나 이러한 방법은 발아시험 시설이 없거나 종자가 휴면상태에 있는 경우 또는 기존의 발아시험으로 발아가 안 될 경우에 사용된다.

(1) 테트라졸륨 시험

  테트라졸륨 시험(tetrazolium test)은 종자 내 호흡작용에 영향을 미치는 산화효소가 살아 있는지의 여부를 시약의 발색 반응으로 확인하는 방법이다. 무색인 2,3,4-triphenyltetrazolium chloride는 종자 내 호흡에 핵심적인 역할을 하는 데히드로게나아제(dehydrogenase)에 의해 붉은색의 포마잔(formazan)으로 변하며, 이 과정에서 살아있는 조직은 핑크색으로 염색된다. 배 전체가 핑크색으로 변하고 배유가 일정 수준 이상으로 염색되면 생명력이 있는 것으로 간주한다.

AOSA(Association of Official Seed Analysts, 1970)에서 제시난 시험절차는 다음과 같이 요약된다.

1. 물에 종자 침적 : 18~20시간
2. 종피에 상처 유도 : 칼로 주공 쪽을 약간 잘라낸다.
3. 1% 테트라졸륨 용약에 종자 침적 : pH 6.52~7.0, 30℃, 48시간
4. 종자가 핑크색으로 염색된 정도를 검사한다.

(2) 배 추출시험

  배 추출시험은 종자로부터 배를 추출하고 배양과정에서 변화를 관찰하는 것이다. 상처 없이 추출한 배를 유리그릇 속 습기가 있는 여과지 위에 놓고, 18~20℃의 온도에서 10~14일간 배양한다. 살아있는 배는 흰색으로 원형을 유지하거나 성장하거나 녹색으로 변하며, 죽은 배는 어두운 색으로 변하거나 곰팡이가 번지는 것을 관찰할 수 있다.

(3) 기타 방법

  기타 방법으로 널리 쓰이는 것은 X선 투시에 의해 배와 배유의 모양을 사진으로 관찰하는 X선 사진법(X-ray photography)이 있다. 이 방법은 특히 충실종자, 비립종자, 그리고 손상종자를 감별해 내는데 편리하다. 종자 그대로의 X선 사진은 명암이 흐리기 때문에 영상을 뚜렷하게 해주는 대조법을 활용한다. 종자를 중금속인 염화바륨 용액에 침전시키면 염화바륨은 죽은 종자 속으로 침투하여 X선상에 불투명하게 나타나기 때문에 살아 있는 종자와 대조가 잘 된다. 이 밖에 인디고카민(indigo carmin), 셀레늄(selenium), 텔루륨(tellurium)에 의한 염색법은 테트라졸륨 시험이 개발되기 전에 이용된 방법들로 신빙성이 적다.

 

 

출처 : 수목생리학(서울대학교출판문화원)